Ειδικά βήματα για την εξαγωγή χλωροφύλλης μέσω κυτταρικού κατακερματισμού με χρήση υπερηχητικού θραυστήρα κυττάρων

Ο υπερηχητικός θραυστήρας κυττάρων χρησιμοποιεί το αποτέλεσμα διασποράς του υπερήχου σε υγρό για να δημιουργήσει σπηλαίωση, σπάζοντας έτσι στερεά σωματίδια ή ιστούς κυττάρων στο υγρό.
Η ανάπτυξη της βιολογικής βιομηχανίας έχει αυξήσει τις απαιτήσεις για πειράματα με χρήση κονιοποιητών κυττάρων υπερήχων, όπως η μέτρηση και ο έλεγχος της θερμοκρασίας του δείγματος, η βελτίωση του επιπέδου νοημοσύνης των δειγμάτων ψύξης χαμηλής θερμοκρασίας και ολόκληρου του μηχανήματος κ.λπ.
Τα συγκεκριμένα βήματα για την εκχύλιση χλωροφύλλης μέσω σύνθλιψης κυττάρων υπερήχων με χρήση θραυστήρα κυττάρων υπερήχων:
1. Φυγοκεντρήστε ή φιλτράρετε το δείγμα νερού και τοποθετήστε μια μεμβράνη φίλτρου οξικής ίνας στο φίλτρο αναρρόφησης. Ρίξτε έναν ποσοτικό όγκο δείγματος νερού για διήθηση και η αρνητική πίεση κατά τη διήθηση δεν πρέπει να είναι πολύ υψηλή (περίπου 50 kPa). Αφού ληφθεί το δείγμα νερού, συνεχίστε να τραβάτε για 1-2 λεπτά για να μειώσετε την υγρασία στη μεμβράνη του φίλτρου. Εάν απαιτείται βραχυπρόθεσμη αποθήκευση για 1-2 ημέρες, μπορεί να αποθηκευτεί σε κανονικό ψυγείο για κατάψυξη. Εάν απαιτείται μακροχρόνια αποθήκευση (30 ημέρες), θα πρέπει να φυλάσσεται σε ψυγείο χαμηλής θερμοκρασίας (-20 βαθμός ).
2. Βγάλτε τη μεμβράνη φίλτρου που περιέχει φυτοπλαγκτόν και στεγνώστε τη σε χαμηλή θερμοκρασία στο ψυγείο για 6-8 ώρες. Το κόβουμε σε μικρά κομμάτια με ένα ψαλίδι και το τοποθετούμε σε φυγοκεντρικό σωλήνα των 5ml ή 10ml. Προσθέστε 3-4 ml ακετόνης 90% για να βυθίσετε τα θραύσματα κάτω από το επίπεδο του υγρού. Τοποθετήστε τα θραύσματα σε ένα δοχείο υπερήχων και χρησιμοποιήστε υπερηχητικά κύματα για να σπάσετε τα κύτταρα του δείγματος. (Σύγκριση πειραμάτων σε διαφορετικούς χρόνους και συχνότητες για τη διευκόλυνση της αναγνώρισης * χρόνου και συχνότητας κατακερματισμού για ενοποιημένες μεθόδους).
3. Φυγοκεντρήστε το δείγμα που υποβλήθηκε σε κατακερματισμό κυττάρων χρησιμοποιώντας υπερήχους χρησιμοποιώντας φυγόκεντρο (3000-4000r/min) για 10 λεπτά. Χύστε το υπερκείμενο σε ογκομετρική φιάλη των 5 ml ή 10 ml. Αραιώστε σε 5 ml ή 10 ml με 90% ακετόνη και ανακινήστε καλά.
4. Τοποθετήστε το υπερκείμενο σε ένα φασματοφωτόμετρο και χρησιμοποιήστε ένα χρωματομετρικό δίσκο οπτικής διαδρομής 1 cm για να διαβάσετε τις τιμές απορρόφησης σε μήκη κύματος 750 nm, 663 nm, 645 nm και 630 nm, αντίστοιχα. Χρησιμοποιήστε 90% ακετόνη ως μέτρηση απορρόφησης τυφλού για να διορθώσετε την απορρόφηση του δείγματος.